产品和服务

基因编辑服务

我们自主研发的基于 CRISPR/Cas9 的基因编辑技术,,,将编辑效率提升 10 至 20 倍,,,,既加速了定制化模型的研发进程,,,,也让你的研究更具成本效益。。。。
基因编辑服务助力研究人员探究基因功能,,建立特定基因与生理及病理表型的关联。。。。这类服务还广泛应用于疾病动物模型的构建,,为新型疗法研发提供支持。。。基于 CRISPR/Cas9 的基因编辑技术可实现人源化动物模型的构建,,该类模型被广泛应用于疾病研究、、、药物筛选、、器官移植、、、、诊断学及个性化医疗领域,,,,尤其在肿瘤学领域应用深远。。。
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    为何选择安安物联????—— 基因编辑服务领域的全球专家
    过去十年间,,,安安物联已发展成为基因编辑服务与动物模型构建领域的全球领导者。。。。我们的尖端技术平台,,,不仅打造了丰富的人源化小鼠模型库(适用于研究、、、、药物筛选及治疗效果评估),,,,还能提供定制化体外及体内模型。。
    我们每年约构建 800 种新型体内模型,,,,包括人类基因敲入小鼠品系。。。安安物联致力于提供卓越品质的产品、、、优质的技术支持及快速的交付周期,,,,助力你达成科研目标。。。我们实施严格的质量控制措施,,确保产品的一致性与可靠性。。。。欢迎联系我们的专家,,探讨安安物联的基因编辑技术优势及定制化动物模型解决方案,,如何助力你的临床前研究取得成功。。
    探索我们的技术平台与基因靶向策略
    根据你特定的项目目标,,,,我们的专业科学家将与你协作,,筛选最适配的基因编辑技术,,用于构建疾病动物模型、、人源化小鼠模型,,,,或定制化基因敲入 / 敲除小鼠品系。。由于每个项目在成功率要求、、、、时间周期及资源分配上存在差异,,,,建议你咨询我们的团队,,,获取最契合你的科学研究与转化医学研究需求的专属实验设计方案。。
    基因编辑策略

    安安物联的专业技术团队和销售人员致力于帮助研究人员实现他们的动物模型需求。。。。我们定制模型所采用的基因编辑策略包括:

    全身敲除(KO)

    在全身基因敲除(KO)小鼠模型中,,,目标基因的外显子会被整体删除(EGE™方法)或用阳性选择标记(大多数情况下为新霉素)替换,,,,从而使该基因失活。。。。在全身敲除小鼠中,,目标基因在所有组织中均被破坏。。

    Global Knockout (KO)
    全身敲入(KI)

    全身性基因敲入小鼠模型将突变或外源DNA序列整合至小鼠基因组的特定位点。。。这些模型可以模拟基因突变引起的人类遗传性疾病,,,,或者在基因与不同蛋白标签(如EGFP、、mRFP、、、mCherry、、、、YFP、、、、LacZ和Flag)标记时进行基因表达监测。。。。

    Global Knockin (KI)
    条件性基因敲除(cKO)

    条件性敲除(cKO)模型通过 Cre-LoxP/Flp-Frt 重组系统构建。。。待敲除的靶片段两侧会插入 LoxP(或 Frt)元件,,,随后将该 “loxP 位点修饰小鼠”(Floxed 小鼠)与组织特异性 Cre 小鼠或 Flp 小鼠进行杂交 —— 使子代基因组中 LoxP 位点之间的序列以组织特异性模式被删除。。。在典型设计中,,,Cre 小鼠仅在靶组织中启动重组反应。。。LoxP 片段通常插入含 ATG 起始密码子的外显子下游的内含子中,,,,删除两侧翼外显子后会导致移码突变,,,,进而阻断蛋白质表达。。。

    Conditional Knockout (cKO)
    利用 Cre 小鼠系统的条件性敲入(cKI)

    条件性敲入(cKI)小鼠模型可实现外源性遗传元件(如点突变、、、报告基因或功能表达盒)的组织特异性激活 —— 通过将携带 loxP 位点修饰等位基因(floxed 等位基因)的小鼠与组织特异性或诱导性 Cre 小鼠(或 CreERT2 小鼠)进行杂交,,,,确保仅在 Cre 重组酶存在的部位启动激活。。。。此类模型通常采用 FLEx(翻转 - 切除 / 双 lox 位点)系统或基于迷你基因的设计构建,,,,使工程化突变或报告基因能够以空间和 / 或时间调控的方式表达。。。这种由 Cre-lox 系统介导的条件性敲入策略,,,,被广泛应用于基因调控研究、、、谱系示踪及细胞类型特异性生物学功能解析。。。

    Conditional Knockin (cKI)
    传统点突变敲入

    传统点突变小鼠模型是一种基因敲入品系,,,其基因组中的一个或多个核苷酸被变异核苷酸所替换。。。该突变导致给定蛋白质序列内的氨基酸置换,,,或移码突变。。这类点突变敲入模型被广泛用于研究特定核苷酸或氨基酸在蛋白质中的作用,,,为人类遗传性疾病研究提供直接参考。。

    Conventional Point Mutation Knockin
    条件性点突变敲入

    条件性点突变小鼠模型在满足特定条件时引入点突变。。在下面的基因靶向策略中,,,当Cre重组酶存在时,,,,点突变将通过Cre活性在组织特异性地引入。。。。以下示出了两种主要的设计策略。。。

    Conditional Point Mutation Knockin 2

    传统转基因小鼠模型通过原核显微注射质粒构建,,可获得多个不同基因组整合位点的首建鼠(Founder)。。。。由于外源基因整合拷贝数及位点的差异,,,不同首建鼠的实验结果可能存在变异且难以重复。。目前,,研究者普遍采用位点特异性整合策略构建基因编辑小鼠模型。。其中,,,,Rosa26是最常用的"安全港"位点,,,因其编码的是一个在几乎所有组织中均表达的非必需核RNA。。。通过在Rosa26位点外源序列上游插入LoxP-3XSTOP-LoxP序列,,,并与Cre工具鼠交配,,即可实现外源基因的条件性表达。。。。其他常见安全港位点还包括H11和TIGRE。。

    Rosa26 Locus Knockin

    基因被EGFP、、YFP、、、LacZ、、、、Flag、、、、mCherry等标签标记,,,便于监测基因表达。。。告基因小鼠模型可用于构建细胞发育谱系,,同时通过内源基因替换策略,,可在同一模型中实现基因敲除与敲入的双重目的。。

    Tag & Reporter Gene

    Tol2小鼠模型利用Tol2转座酶活性构建转基因小鼠。。。。Tol2转座子系统不仅能提高基因整合率,,还倾向于将外源基因整合到AT丰富的区域。。。

    Tol2 Transgenic Mouse Model​
    基因编辑技术
    Gene Editing by Technology
    基于CRISPR/EGE™的基因编辑
    优势与劣势
    • 高效率
    • 大规模基因敲除/敲入能力
    • 同时靶向多个基因
    • 适用于多种物种
    • 易于构建
    • 通过选择合适的sgRNA,,,,可以减少脱靶效应
    • 脱靶效应可通过选择合适的sgRNA并通过繁殖消除;Southern blot用于排除随机插入
    应用
    • 传统KO小鼠/大鼠
    • 条件性KO小鼠/大鼠
    • ROSA26位点基因KI小鼠/大鼠
    • 基因KI/突变小鼠/大鼠
    • 人源化小鼠/大鼠
    • 报告基因/KO然后是cKO小鼠/大鼠
    • 正常细胞系KO/KI
    • hESC/iPS细胞KO/KI
    时间线
    • 5-7个月
    查看详情
    我们的基因编辑服务如何工作

    安安物联结合生物信息学分析方法,,通过搜索目标基因组中与sgRNA相似的序列区域来降低脱靶效应。。因此,,只选择具有高特异性和高活性的sgRNA。。。。作为质量控制措施的一部分,,,我们可以执行两轮PCR,,,以扩增潜在脱靶位点周边的基因组区域,,然后通过测序检测脱靶事件。。。我们还将Southern blot整合到我们的工作流程中,,,,作为检测敲入和条件性敲除动物模型构建的重要质量控制步骤,,以检测任何潜在的随机插入。。项目启动后,,,我们将为您配备专属项目经理,,,,定期(每月)汇报模型构建进展,,,,并提供全天候技术咨询支持。。。。

    How Our Gene Editing Services Work
    案例研究

    获取有关我们基因编辑服务技术的更详细信息,,请下载基因编辑手册。。。。

    案例研究 1
    Flvcr2 条件性敲除(cKO)和报告基因敲入(KI)通过FLEx策略

    Flvc2GFP 等位基因是通过在胚胎干细胞中进行同源重组产生的。。。。引入了两组反向loxP位点(一个常规组和一个突变组),,以便在Cre重组后去除第二个外显子并翻转eGFP基因。。。。通过Southern blot验证克隆构建体,,,使用了两个探针和两个限制性内切酶。。。。

    Flvcr2 Conditional Knock-Out (cKO) and Reporter Knock-in (KI) by FLEx Strategy
    常见问题(FAQ)
    问题 1:什么是转基因小鼠??
    转基因小鼠是通过基因工程改造的实验动物,,,其基因组中被特意插入了外源基因。。。。这类基因修饰小鼠是生物医学研究中的强大工具,,,能让科学家在体内研究基因功能、、构建人类疾病模型,,,,并评估潜在治疗药物。。。。
    通过导入或修饰特定基因,,研究人员可构建癌症、、心血管疾病、、、、神经系统疾病及免疫相关疾病的模型。。转基因小鼠模型广泛应用于临床前研究,,包括药物研发、、、、基因治疗研究和毒理学检测,,,,提供了传统动物模型无法实现的关键研究数据。。。。
    转基因小鼠的培育依赖 CRISPR/Cas9 等先进基因编辑技术,,确保目的基因的精准插入。。因此,,,这类小鼠已成为药物研发、、、遗传学研究和精准医疗中不可或缺的工具。。。
    转基因小鼠的核心优势:
    • 精准模拟人类遗传性疾病
    • 检测药物的有效性与安全性
    • 在体内解析基因功能
    • 助力生物技术及药物研发
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