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类风湿性关节炎(Rheumatoid Arthritis,,RA)是最常见的自身免疫性疾病之一,,,其临床症状主要表现有全身关节肿胀、、、疼痛和运动失调等,,,,病情极其严重的甚至可能会导致残疾。。。而病理主要表现出增生性滑膜炎,,软骨损伤以及骨结构的破坏。。
胶原诱导性关节炎(CIA)模型:
通过免疫接种II型胶原(CII),,,,即关节软骨的主要成分,,,诱导CIA小鼠发展为自身免疫性多关节炎,,模拟人类RA的临床和组织学特征。。。。
胶原抗体诱导性关节炎(CAIA)模型:
通过注射抗胶原抗体诱导发病。。。。该模型起病迅速,,广泛用于急性关节炎的进展机制研究。。
佐剂诱导性关节炎(AIA)模型:
又称弗伦佐剂关节炎(Freund's adjuvant arthritis),,反映了多种类风湿性关节炎(RA)患者的临床特征,,,,分为完全弗伦佐剂(CFA)和不完全弗伦佐剂(IFA),,,其中CFA是研究最为广泛的类风湿性关节炎自身免疫模型。。
为了支持RA治疗药物的开发,,,安安物联已在多种小鼠品系(C57BL/6、、、DBA 和 BALB/c)中建立了多种稳定可靠的RA模型,,适用于候选药物的临床前药效评估。。。
| Readout | ||
| Included tests | Phenotype | Body weight |
| Clinical score | ||
| Histopathology | H&E(Paws) | |
| Optional tests | Tissue homogenate | Cytokines test |
| Peripheral blood flow cytometry | Flow cytometry assay | |
| Mice strains |
| B-hIL6/hIL6R |
| B-hTNFA/hTNFR2/hTNFR1 |
| B-hOX40hOX40L |
| B-hCD40 |
| B-hPD1 |
| Clinical score | Symptoms of CIA |
| Score 0 | Normal |
| Score 1 | Redness and swelling of one joint type (A, B, C) |
| Score 2 | Redness and swelling of both joint types (A, B, C) |
| Score 3 | Redness and swelling of the three joint types (A, B, C) |
| Score 4 | The whole paw is red and swollen to the maximum extent |
| Joint types: A: interphalangeal joint B: metacarpophalangeal joint C: wrist and tarsal joint | |
胶原诱导关节炎CIA模型。。。 DBA/1小鼠或C57BL/6小鼠在第0天(200 μg)和第21天(200 μg)分别接种CII乳剂免疫。。。。第二次免疫后,,,每周记录体重(A)和临床评分(B)两次,,,并计算关节炎的发生率(C)。。。实验终点时,,,,采集骨组织进行H&E染色(D, E)。。数据以平均值 ± SEM表示,,,n=4-10。。(*p<0.05, **p<0.01, ***p<0.001, ****p<0.0001)。。。
甲氨蝶呤对CIA小鼠模型的治疗效果。。
(A) 小鼠体重变化;(B) 临床评分;(C) 小鼠发病率;(D) 病理评分;(E) 病理切片的H&E染色。。。。均值±SEM(*p<0.05, **p<0.01, ***p<0.001, ****p<0.0001)。。。。
抗人IL-6抗体sirukumab(内部制备)在CIA小鼠模型中的药效作用。。。(A)小鼠体重变化;(B)临床评分。。。。结果显示:在模型成功建立后,,,治疗组(G3,G4)小鼠用sirukumab抗体进行治疗,,,,显示出治疗作用,,,,且表现出剂量依赖性。。实验结束时,,,,对四肢关节进行组织病理学检查。。。。(C)苏木精-伊红(H&E)染色。。(D)关节病理学评分。。。。均值±SEM
通过胶原(CII)诱导B-hTNFA/hTNFR2/hTNFR1小鼠和C57BL/6小鼠的关节炎模型。。。
(A)小鼠体重变化;(B)临床评分。。结果显示,,B-hTNFA/hTNFR2/hTNFR1小鼠的临床评分显著增加,,表明关节炎模型已成功建立。。。均值±SEM。。。
在B-hTNFA/hTNFR2/hTNFR1小鼠和C57BL/6小鼠中关节炎模型的病理分析。。。
(A)病理评分;(B)病理切片的H&E染色:(a)滑膜;(b)炎症细胞浸润;(c)滑膜增生;(d)骨结构损伤;(e)骨髓中的炎症细胞。。模型组中观察到皮下混合炎症细胞浸润、、关节周围狭窄、、关节软骨和骨组织破坏等关节病变,,,表明关节炎模型已成功建立。。。。均值±SEM。。。。
抗人TNF-α抗体Adalimumab在CIA小鼠模型中的药效作用。。。 (A)小鼠体重变化;(B)临床评分。。。。高剂量Adalimumab处理的G4组小鼠临床评分较G2组降低。。(C)研究结束时收集小鼠关节,,,,进行苏木精-伊红(H&E)染色,,,显示病理评分(D)。。。平均值±SEM。。。
抗人OX40L抗体Amlitelimab在CIA小鼠模型中的药效作用。。。
(A)实验设计示意图;(B)临床评分。。Amlitelimab治疗组(G3)降低了CIA模型中的临床评分。。。数据以平均值±SEM表示,,,,并使用双向方差分析后进行Dunnett比较与G2组进行对比。。。。(*p<0.05,,**p<0.01,,***p<0.001,,,,****p<0.0001)。。(C)研究结束时收集小鼠关节,,进行苏木精-伊红(H&E)染色,,,显示病理评分(D)。。。。数据以平均值±SEM表示,,,并使用单向方差分析后进行Dunnett比较与G2组进行对比。。。(*p<0.05,,,,**p<0.01,,***p<0.001,,****p<0.0001)。。
抗人CD40抗体在CIA小鼠模型中的药效作用。。
(A)实验设计示意图;(B)临床评分。。。(C)发病率;(D)研究结束时收集小鼠关节,,,进行苏木精-伊红(H&E)染色,,,,显示病理评分。。抗CD40抗体治疗降低了CIA动物模型的发病率和临床评分(G4-G6)。。。(E)关节组织学评分。。(F)小鼠体重变化。。数据以平均值±SEM表示,,,,并使用单向方差分析后进行Dunnett多重比较与G3组进行对比。。。。(*p<0.05,,,**p<0.01,,***p<0.001,,,****p<0.0001)。。
在B-hPD-1小鼠中诱导的胶原性关节炎模型。。。 (A) 临床评分;(B) 发病率; (C) CIA建模后B-hPD-1小鼠的体重变化。。平均值 ± SEM。。。。
| Mice | Gender | Incidence on Day28 | Incidence on Day32 |
| B-hIL6/hIL6R mice | M | 34% | 40% |
| B-hTLR8 mice | F | 60% | 50% |
| B-hCD40 mice | F | 50% | 50% |
| B-hOX40/OX40L mice | M | 20% | 60% |
| B-hPD1 mice | F | 60% | 60% |
| M | 60% | 80% | |
| B-hTNFA/hTNFR2/hTNFR1 mice | F | 48% | 55% |
| M | 80% | 80% |
| Readout | ||
| Included tests | Phenotype | Body weight |
| Clinical score | ||
| Histopathology | H&E(Paws) | |
| Optional tests | Tissue homogenate | Cytokines test |
| Peripheral blood flow cytometry | FACS test | |
| Mice strains |
| C57BL/6 |
| BALB/c |
| B-hTNFA |
| Clinical score | Symptoms of CIA |
| Score 0 | Normal |
| Score 1 | Redness and swelling of one joint type (A, B, C) |
| Score 2 | Redness and swelling of both joint types (A, B, C) |
| Score 3 | Redness and swelling of the three joint types (A, B, C) |
| Score 4 | The whole paw is red and swollen to the maximum extent |
| Joint types: A: interphalangeal joint B: metacarpophalangeal joint C: wrist and tarsal joint | |
胶原抗体诱导的关节炎模型。。 C57BL/6小鼠的CAIA模型临床评分(A)和发病率(B)。。。采用双因素ANOVA及多重比较。。。。结果以平均值 ± 标准误差表示。。****p<0.0001, ***p<0.001, **p<0.01, *p<0.05。。。(C) 研究终点时收集小鼠关节,,进行H&E染色,,,显示病理评分(D)。。。
甲氨蝶呤Methotrexate对胶原抗体诱导的关节炎的药效作用。。。 小鼠在第0天接受mAb注射,,第3天接受LPS注射。。从第3天起每天记录体重(A)和临床评分(B),,,,结果以平均值 ± SEM表示,,,****p<0.0001, ***p<0.001, **p<0.01, *p<0.05。。。
图1. 测试物质对B-hTNFA小鼠CAIA模型的体重变化影响。。。。与G1非造模对照组相比,,,,G2造模组在CAIA诱导后体重显著下降(A, B)。。。。测试药物,,,,甲氨蝶呤(G3)和阿达木单抗(G4)治疗组在体重上未出现显著下降,,表明其治疗效果较好。。。使用双向方差分析并进行多重比较,,,,所有组与G2组进行比较。。数据以平均值±SEM表示,,****p<0.0001,,,,***p<0.001,,,,**p<0.01,,,*p<0.05。。。
图2. 测试物质对B-hTNFA小鼠CAIA模型临床评分的影响。。。。与G1非造模对照组相比,,,,G2造模组在CAIA诱导后临床评分显著增加。。。甲氨蝶呤(G3)和阿达木单抗(G4)治疗组显示临床评分降低,,,,表明测试药物具有治疗效果。。。。使用双向方差分析并进行多重比较,,,,所有组与G2组进行比较。。。。数据以平均值±SEM表示,,,,*p<0.05,,,**p<0.01,,,,***p<0.001,,,****p<0.0001(G1显著性未显示)。。。。
图3. 测试药物对B-hTNFA小鼠CAIA模型左后肢组织中细胞因子水平的影响。。。与G2造模组相比,,,G2非造模组的小鼠左后肢中IL-6、、IL-10、、IFN-γ的表达水平无显著差异,,,,而IL-1β在G1和G2之间显著增加,,,并在G3和G4测试药物处理组中逆转。。数据以平均值±SEM表示,,,,并使用单向方差分析后进行Dunnett比较与G2组进行对比。。。****p<0.0001,,,,***p<0.001,,,,**p<0.01,,,,*p<0.05。。。。
大鼠中的佐剂诱导性关节炎(doi: 10.1002/0471142735.im1504s19)。。
针对热休克蛋白65(heat-shock protein 65, HSP65)致病性和保护性表位的T细胞具有交叉反应性,,,,并表现出功能上的相似性:这是调控自身免疫性关节炎的一种新机制。。
| Readout | ||
| Included tests | Phenotype | Body weight |
| Clinical score | ||
| Histopathology | H&E(Paws) | |
| Optional tests | Tissue homogenate | Cytokines test |
| Peripheral blood flow cytometry | FACS test | |
| Mice strains |
| SD rat |
| Score | Symptom |
| Score 0 | No erythema or swelling |
| Score 1 | Slight erythema or swelling of one of the toes or fingers |
| Score 2 | Erythema and swelling of more than one toe or finger |
| Score 3 | Erythema and swelling of the ankle or wrist |
| Score 4 | Complete erythema and swelling of toes or fingers and ankle or wrist, and inability to bend the ankle or wrist |
佐剂诱导性大鼠关节炎(AIA)模型。。 大鼠(7周龄,,,,雄性)在第0天尾基部皮下注射MT/IFA(10mg/mL;100μL)悬液(G1,,,,n=5;G2,,n=3),,从第7天开始,,,,每两天记录体重和评分直到实验结束(A)。。。佐剂诱导的大鼠爪部肿胀和发红(B),,所有AIA大鼠的爪部评分(C)。。H&E染色显示AIA大鼠存在炎症、、血管性突起、、滑膜增生(D,,,E)。。数据以平均值±SEM表示,,,,****p<0.0001,,,***p<0.001,,,,**p<0.01,,*p<0.05。。